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第十二章
消毒灭菌
当环境适宜时，细菌能进行正常的新陈代谢而生长繁殖；若环境条件变化，可引起细菌的代谢和其他性状发生变异；若环境条件改变剧烈，可使细菌生长受到抑制或导致死亡。在医疗实践中，可利用环境对细菌不利因素，抑制或杀灭病原微生物，以达到消毒灭菌的目的。
第一节
基本概念
消毒（Disinfection）：杀灭病原微生物的方法。用以消毒的药物称为消毒剂(Disinfectants)一般消毒剂在常用浓度下，只对细菌繁殖体有效。对于芽胞则需要提高消毒剂的浓度和延长作用的时间。
灭菌（Sterilization）：杀灭物体上所有的微生物（包括病原体和非病原体的繁殖体和芽胞）的方法。
无菌（Asepsis）：物体上或容器内无活菌存在的意思。
无菌操作：防止微生物进入机体或其他物品的操作技术。例如，进行外科手术或微生物学实验时，须注意无菌操作。
防腐（Antisepsis）：防止或抑制微生物生长繁殖的方法。
卫生清理(sanitation):将微生物污染了的无说明表面还原未安全水平的过程.
第二节
物理消毒灭菌法
一、热力灭菌
高温对细菌有明显的致死作用。热力灭菌主要是利用高温使菌体变性或凝固，酶失去活性，而使细菌死亡。热力灭菌包括湿热灭菌和干热灭菌法。
1.干热灭菌法：干热灭菌比湿热灭菌需要更高的温度与较长的时间。
（1）干烤：利用干烤箱，加热160～180℃2小时，可杀死一切微生物，包括芽胞菌。主要用于玻璃器皿、瓷器等的灭菌。
（2）烧灼和焚烧：烧灼是直接用火焰杀死微生物，适用于微生物实验室的接种针等不怕热的金属器材的灭菌。焚烧是彻底的消毒方法，但只限于处理废弃的污染物品。
2.湿热灭菌法
（1）温热的杀菌效果比干热好，其原因有：
①蛋白质凝固所需的温度与其含水量有关，含水量愈大，发生凝固所需的温度愈低。
②温热灭菌过程中蒸气放出大量潜热，加速提高湿度。因而湿热灭菌比干热所要温度低，如在同一温度下，则湿热灭菌所需时间比干热短。
③湿热的穿透力比干热大，使深部也能达到灭菌温度，故湿热比干热收效好。
（2）湿热灭菌法包括有：
煮沸法：煮沸100℃，5分钟，能杀死一般细菌的繁殖体。水中加入2%碳酸钠，可提高其沸点达105℃。既可促进芽胞的杀灭，又能防止金属器皿生锈。煮沸法可用于饮水和一般器械（刀剪、注射器等）的消毒。
流通蒸汽灭菌法：利用100℃左右的水蒸汽进行消毒，一般采用流通蒸汽灭菌器（其原理相当于我国的蒸笼），加热15到39分钟，可杀死细菌繁殖体。
间歇灭菌法：利用反复多次的流通蒸汽，以达到灭菌的目的。本法适用于不耐高温的营养物（如血清培养基）的灭菌。
巴氏消毒法：利用热力杀死液体中的病原菌或一般的杂菌，同时不致严重损害其质量的消耗方法。加温61.1～62.8℃半小时，或71.7℃15～30秒钟。常用于消毒牛奶和酒类等。
高压蒸汽灭菌法：压力蒸汽灭菌是在专门的压力蒸汽灭菌器中进行的，是热力灭菌中使用最普遍、效果最可靠的一种方法。其优点是穿透力强，灭菌效果可靠，能杀灭所有微生物。目前使用的压力灭菌器可分为两类：下排气式压力灭菌器和预真空压力灭菌器。适用于耐高温、耐水物品的灭菌。
二、紫外线与电离辐射
1.紫与外：紫外线是一种低能量的电磁辐射，波长范围为240～280nm,最适的波长为260nm，这与DNA吸收光谱范围相一致。
杀菌原理是紫外线易被核蛋白吸收，使DNA的同一条螺旋体上相邻的碱基形成胸腺嘧啶二聚体，从而干拢DNA的复制，导致细菌死亡或变异。
紫外线的穿透能力弱，不能通过普通玻璃、尘埃，只能用于消毒物体表面及空气、手术室、无菌操作实验室及烧伤病房，亦可用于不耐热物品表面消毒。杀菌波长的紫外线对人体皮肤、眼睛均有损伤作用，使用时应注意防护。
2.电离辐射：包括高速电子、X线和r线等。具有较高的能量与穿透力，可在常温下对不耐热的物品灭菌，故又称“冷灭菌”。其机理在于产生游离基，破坏DNA。可用于消毒不耐热的塑料注射器和导管等；亦能用于食品消毒而不破坏其营养成份。
三、滤过除菌法
将液体或空气通过含有微细小孔的滤器，常用于除菌的为0.22um，只允许小于孔径的物体如液体和空气通过，大于孔径的的物体不能通过。主要用于一些不耐热的血清、毒素、抗生素、药液、空气等除菌。一般不能除去病毒、支原体和细菌的L型。
第三节
化学消毒法
一、化学消毒剂：化学消毒剂的种类很多，其杀菌作用亦不尽相同。
二、化学消毒剂的作用机制：不同的化学消毒剂其作用原理也不完全相同
（1）改变细胞膜通透性：表面活性剂（Surface-active
agent）、酚类及醇类可导致胞浆膜结构紊乱并干扰其正常功能。使小分子代谢物质溢出胞外，影响细胞传递活性和能量代谢。甚至引起细胞破裂。
（2）蛋白变性或凝固：酸、碱和醇类等有机溶剂可改变蛋白构型而拢乱多肽链的折叠方式，造成蛋白变性。如乙醇、大多数重金属盐、氧化剂、醛类、染料和酸碱等。
（3）改变蛋白与核酸功能基团的因子：作用于细菌胞内酶的功能基（如SH基）而改变或抑制其活性。如某些氧化剂和重金属盐类能与细菌的-SH基结合并使之失去活性。
三、影响消毒剂作用的因素
（1）消毒剂的性质、浓度与作用时间
（2）微生物的污染程度：微生物污染程度越严重，消毒就越困难。
（3）微生物的种类和生活状态：细菌芽胞的抵抗力最强，幼龄菌比老龄菌敏感。
（4）环境因素：当细菌和有机物特别是蛋白质混在一起时，某些消毒剂的杀菌效果可受到明显影响，因此在消毒皮肤及器械前应先清洁再消毒。
（5）温度、湿度、酸碱度
消毒速度一般随温度的升高而加快，所以温度越高消毒效果越好。
（6）化学拮抗物：阴离子表面活性剂可降低季胺盐类和洗比泰的消毒作用，因此不能将新洁尔灭等消毒剂与肥皂、阴离子洗涤剂合用。
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